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探討酶標(biāo)儀熒光檢測(cè)模式
更新時(shí)間:2016-04-05   點(diǎn)擊次數(shù):2425次
基于酶標(biāo)儀熒光光路的熒光偏振在檢測(cè)光路上需要起偏器、偏振片,而單色器(光柵)系統(tǒng)是無(wú)法添加這樣的光學(xué)元件的,因此,只有濾光片系統(tǒng)可以完成熒光偏振的檢測(cè)。
帶寬:與吸收光模式不同,熒光染料的發(fā)射光都很強(qiáng),其他成分的干擾很小,因此能否透過(guò)更多的光也是決定儀器靈敏的因素。在染料的激發(fā)和發(fā)射峰形上能截取到更大的峰面積也成為必要條件。單色器的帶寬通常是固定的 16nm ,比較窄,濾光片 5-100nm 可選的帶寬是強(qiáng)過(guò)單色器的,根據(jù)濾光片對(duì)熒光染料的波長(zhǎng)特異性,使用相應(yīng)的濾光片則代表著使用了適宜的帶寬,在保證特異性的前提下大化的提高檢測(cè)靈敏度。靈敏度的提高同時(shí)也意味著試劑的節(jié)省,因?yàn)橐_(dá)到同樣效果可以采用更少的實(shí)驗(yàn)體系。
所以,熒光檢測(cè)模式的佳光路選擇是鹵鎢燈 + 濾光片系統(tǒng)。但是,如果您是從事研發(fā),或者是特殊的實(shí)驗(yàn)要求,比如是開發(fā)熒光染料,需要通過(guò)熒光光譜掃描來(lái)確認(rèn)染料的激發(fā)或發(fā)射峰的位置,則需要使用鹵鎢燈 / 高能氙燈 + 單色器(光柵)系統(tǒng)。

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